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多光谱成像技术

多光谱成像技术

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Opal-TSA多标记免疫组化
Opal工作原理

多标记免疫组化染色存在诸多困难,例如抗体种属交叉反应、多轮处理后的标签稳定性、高低信号之间的平衡以及弱表达标记物的检测等。因而在FFPE组织或冷冻切片中检测三种或更多生物标记物成为限制研究者的一大障碍。

Opal是利用TSA技术开发的多标记复染方案,利用TSA信号不受微波影响,并能在抗体去除后保留信号的原理。可以为组织样品特别是FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)样品进行染色,并且允许在同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行多标记识别。配合Vectra多光谱成像分析系统,可以获得高信噪比(扣除背景荧光)的图像和进行精准的批量定量分析。

Opal独特优势

同一切片实现多达7种生物标记染色(含核染)

检测灵敏度较普通IHC提高近100倍

可使用同一种属来源的一抗,且无干扰

降低一抗使用量从而节约成本

微波去除一抗/二抗干扰

洗脱去非特异性染色

肿瘤免疫多靶点检测

研究者可以根据需要,配合Opal多重染色技术,使用相同或不同种 属来源的一抗检测靶蛋白。


研究方向:


肿瘤浸润性淋巴细胞检测;

实体瘤免疫检测;

免疫学研究;

淋巴细胞检测。

实验原理

       Opal是一套基于酪酰胺信号放大技术(TSATyramideSignal Amplification)的多标记免疫组化染色方案,为组织样品特别是FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)样品进行染色,并且允许同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行多标记复合染色。配合多光谱成像分析系统,可以获得高信噪比(扣除背景自发荧光)的图像,甚至是多达7种标记的同步染色和共定位及定量分析。

Vectra全光谱图像采集
Vectra工作原理

经由多色免疫荧光染色的样本包含多维的生物学信息,包括组织结构信息、不同细胞型的空间分布信息、不同信号通路蛋白或细胞功能标识物的共表达信息等。

对这些信息的完整记录和充分解读,对于研究疾病发生发展的机制,探讨诊断和治疗疾病的有效方法有着重要意义。 连续切片成像和普通滤光片成像的方式都难以完整记录或准确识别混杂重叠的多标记信号,需要专业的检测方法才能对多标记染色样本中的信息进行有效的记录和解读。

智能组织成像
inForm组织原位定量分析
简介

由于研究人员一直在寻找更好的方法来表征细胞在自身微环境下的分子活性,从完整的组织中提取有意义的信息变得越来越重要。生命科学研究和药物研发的进展常取决于此。在转化肿瘤学中,了解不同微环境中的癌症特点是识别疾病亚型、验证靶标、选择患者进行试验、描述疗效和反应特征以及确定与临床预后的相关性的核心所在。

inForm是已获专利的自动图像分析软件,可以准确地定量组织切片中的生物标记物。能够在单细胞水平进行免疫组化、免疫荧光和原位 RNA 杂交分析,而且允许在单个和多重实验中对微弱的光谱重叠标记物进行分离和测定。inForm 使用已获专利的“自学习”算法自动对特定组织类型进行检测、分割,该软件就像一名专业病理学家,通过鉴别组织的形态模式来找到特定的组织类型。

主要特点

定量分析组织切片和组织微芯片中生物标记物的表达量;

分离重叠的微弱标记信号;

对H&E、IHC染色和免疫荧光标记的固定组织进行细胞分析;

借助“自学习”软件算法自动识别特定的组织类型。

inForm应用于多标记染色“组织原位流式”分析流程
整体解决方案
简介

武汉巴菲尔生物技术服务有限公司,是PerkinElmer多光谱组织成像技术华中地区独家合作实验室,可为广大科研用户提供完整的多光谱技术解决方案。

典型性应用
Research FieldTargetsResearcher
Breast / Ovary TILsCD4 / CD8 / CD20 / cytokeratin / DAPIDr. Michael Feldman, University of Pennsylvania
Melanoma TregsCD3 / CD8 / FOXP3 / S100 / hematoxylinDr. David Rimm, Yale University
Tumor-draining lymph node and breast cancerCD3 / CD8 / PD-1 / PD-L1 / cytokeratin / hematoxylinDr. Peter Lee, City of Hope Research Center
B-cell lymphomaCD3 / CD10 / CD20 / CD21 / BcL2 / BcL6 / DAPIDr. Michael Feldman, University of Pennsylvania
Follicular lymphomaCD4 / CD25 / FOXP3 / hematoxylinDr. Richard Byers, University of Manchester, UK
MelanomaPD-L1 / FOXP3 / CD8 / CD34 / DAPIDr. Bernie Fox, Providence Cancer Institute
MelanomaCD3 / CD4 / CD8 / dendritic cell markersDr. Carl Figdor, University of Nijmegen
MelanomaCD3 / CD8 / PD-L1Drs. Pardoll, Topalian, Taube, Johns Hopkins
Breast cancerCD4 / CD8 / CD20 / PD-L1 / FOXP3 / AE1-AE3 / DAPIDr. Mittendorf, MD Anderson
Lung CancerCD3 / CD8 / CD45RO / FOXP3 / CD137 / cytokeratinDr. Lin, MD Anderson

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