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特色项目

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背景介绍

武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在10年的发展历程中,依托完备的实验硬件设施和技术体系,我们的技术人员积累了丰富的实验操作经验,处理过非常多且复杂的各项技术服务,能为您提供专业的实验设计服务和解决方案。巴菲尔放眼于全球生物医药前言技术转化应用开发,立足于全国生物医药研发检测合作及项目孵化,成果转化。我们紧抓热点,为广大的科研工作者提供更多的优质服务,同时发展自己的特色项目:CRISPR/Cas9文库筛选服务和多光谱成像技术。

CRISPR/Cas9文库筛选服务

CRISPR/Cas9系统自从2011年被张锋实验室等进行改进和应用后,迅速在基因编辑领域占据了绝对的主导地位。2014 年,张锋教授利用CRISPR 技术和二代测序,开发了针对人类全基因组的CRISPR 敲除文库,并在肿瘤细胞系上利用该文库进行了抗药基因的筛选。在获得阳性基因的基础上,获得了新的抗性基因,并且将相关研究发表在Science杂志上。

目前多篇CNS(Cell、Nature、Science)连续报道基于CRISPR/Cas9文库的高通量筛选技术的应用,在NCBI上关于genome-scale CRISPR的文章现在已经有超过120 篇,并且主要集中于Nature、Science、Cell、PNSA等高分杂志及其主要子刊。利用该技术,研究人员在药物靶标发现、基因功能研究、药物敏感基因研究、病毒宿主研究等领域取得了巨大的成功。

巴菲尔生物紧跟科研前沿,已引进人类全基因组敲除文库和人类全基因组激活文库,并推出文库慢病毒包装、稳转细胞株筛选、表型筛选、深度测序、生信分析等一系列服务,能帮您完成全部的文库筛选相关实验,分析获得关键基因。

技术优势

技术优势

快速准确的找到与某种表型相关的基因

全基因组水平筛选,利于发现新靶点

假阳性率较低,靶点命中率高

应用范围广

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多光谱成像技术

多光谱成像技术,可俗称免疫荧光多标,即将我们常见的免疫荧光双标提高到六标,实现了在同一张组织切片上同时标记3~6种蛋白,解决了科研中经常遇到的标记蛋白种类太少,无法在同一张切片上观察不同细胞或者多种蛋白分布情况的难题。那么多光谱成像技术是什么工作原理,同时又具有哪些更加强大的功能?

多光谱成像技术由多标染色、图像采集和图像分析三大模块组成。多标染色采用的是Opal/TSA多标记免疫荧光技术,打破了常规免疫荧光技术的局限性,不受一抗的种属来源限制,能够在同一组织切片样本上复染多达7种荧光标记(含DAPI在内)。图像采集采用了Vectra全光谱图像采集技术,这是最新一代的组织切片成像分析系统,创新性的将光谱成像和切片全景扫描功能完美融合,实现了革命性的技术跨越,通过光谱拆分能够去除自发荧光的干扰,有效识别多重荧光信号,从而获得高品质图像,确保能够进行精准的定量定位分析。

图像分析方面,我们采用的是inForm自动图像分析软件,该软件具有自学习功能,实现准确的智能组织划分,而且输出参数信息非常丰富,例如目标数目、位置、光谱拆分信号水平等。如果目标是细胞,输出参数可以是单细胞多蛋白表达结果,与流式细胞仪所做分析类似。该软件还可对染色区域面积进行计算分析,计算特定区域或者不同结构内的的阳性细胞数目、进行定量病理评分等。

传统免疫荧光Opal/TSA多标记免疫荧光
靶点数目一般标记3种(含DAPI)最多可同时染色7种
一抗种类不同抗体必须是不同的种属来源不受一抗来源限制,即不同抗体均来源于同一种属(如兔抗)也可进行实验
二抗种类荧光探针标记的二抗辣根过氧化物酶标记的二抗,不直接连接荧光标记
染色策略样本抗原的空间位置的差异,需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异,染色过程复杂、多变任何样本无需任何染色策略,简单的重复前一步的染色过程,样本/靶点的差异不影响染色过程,使用简单方便
染色效果亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响,背景较高,对基于单细胞的定量分析不利高染色分辨率和染色特异性,信号强度强,淬灭时间更长,无背景影响,各靶点的信噪比大大提高,尤其适合组织基于单细胞的定量分析
技术优势

技术优势

同一张组织切片上实现多达7种染色

增强抗体灵敏度达1000倍,节约抗体

摆脱一抗种属来源束缚,实现抗体自由选择

组织原位类流式分析

单一细胞多重表达标记实现组织原位观察

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